關(guān)于印發(fā)猴痘防控方案的通知

各省、自治區(qū)、直轄市及新疆生產(chǎn)建設(shè)兵團(tuán)疾控局、衛(wèi)生健康委：

　　為進(jìn)一步做好猴痘防控工作，及時(shí)有效應(yīng)對(duì)猴痘疫情，提升猴痘防控工作的科學(xué)性、精準(zhǔn)性和有效性，切實(shí)維護(hù)人民群眾生命安全和身體健康，國(guó)家疾控局會(huì)同國(guó)家衛(wèi)生健康委制定了《猴痘防控方案》。現(xiàn)印發(fā)給你們，請(qǐng)認(rèn)真組織實(shí)施。

　　國(guó)家疾控局

　　國(guó)家衛(wèi)生健康委

　　2023年7月26日

　　（信息公開形式：主動(dòng)公開）

　　猴痘防控方案

　　猴痘是由猴痘病毒（Mpox virus，MPXV）感染所致的一種人獸共患病。2022年9月，我國(guó)報(bào)告首例猴痘輸入病例。2023年6月以來，我國(guó)多個(gè)省份先后報(bào)告多例猴痘病例，引發(fā)新增本土續(xù)發(fā)疫情和隱匿傳播的風(fēng)險(xiǎn)較高。為指導(dǎo)各地科學(xué)精準(zhǔn)做好猴痘防控工作，切實(shí)維護(hù)人民群眾身體健康，制定本方案。

　　一、總體要求

　　堅(jiān)持“預(yù)防為主、防治結(jié)合、精準(zhǔn)防控、快速處置”原則，落實(shí)“早發(fā)現(xiàn)、早報(bào)告、早隔離、早治療”措施。開展醫(yī)療機(jī)構(gòu)、重點(diǎn)人群、入境人員和重點(diǎn)場(chǎng)所等多渠道監(jiān)測(cè)。加強(qiáng)疫情分析與風(fēng)險(xiǎn)研判，有針對(duì)性地開展重點(diǎn)人群健康教育和綜合干預(yù)。落實(shí)病例隔離治療、流行病學(xué)調(diào)查和密切接觸者追蹤管理等措施。堅(jiān)持發(fā)現(xiàn)一起、控制一起，及時(shí)阻斷疫情傳播。

　　二、疾病特征

　　（一）病原學(xué)特征。

　　猴痘病毒屬于痘病毒科正痘病毒屬，為基因組全長(zhǎng)約197kb的雙鏈DNA病毒。1958年首次在猴子中發(fā)現(xiàn)該病毒。1970年在剛果民主共和國(guó)一名疑似天花患者的標(biāo)本中首次分離到猴痘病毒，為首例確診的人類猴痘病例。

　　猴痘病毒分為兩個(gè)進(jìn)化分支：（1）分支I，曾稱為中非分支或剛果盆地分支；（2）分支II，曾稱為西非分支，進(jìn)一步分為IIa和IIb分支。其中引發(fā)2022年全球非地方性流行區(qū)猴痘暴發(fā)疫情的毒株為IIb分支。IIb分支目前已出現(xiàn)較多亞分支，包括A.1、A.2和B.1等亞分支，2022年9月我國(guó)報(bào)告首例輸入性猴痘病例以來，各地報(bào)送中國(guó)疾控中心病毒病所的毒株序列均屬于IIb分支。

　　猴痘病毒耐干燥和低溫，在痂皮、土壤和衣物、床上用品等物體表面可生存數(shù)月。該病毒對(duì)熱敏感，加熱至56℃30分鐘或60℃10分鐘即可滅活。75%乙醇、含氯消毒劑、過氧乙酸等常用消毒劑及紫外線可有效滅活病毒，對(duì)過氧化氫、次氯酸鈉、戊二醛、鄰苯二甲醛等敏感。

　　（二）流行病學(xué)特征。

　　1.傳染源。猴痘病毒的宿主尚不明確，目前認(rèn)為非洲嚙齒類動(dòng)物（非洲松鼠、樹松鼠、岡比亞袋鼠、睡鼠等）可能為其自然宿主。傳染源包括猴痘病例及感染的嚙齒類動(dòng)物、猴和猿等靈長(zhǎng)類動(dòng)物。

　　2.傳播途徑。猴痘病毒主要經(jīng)黏膜和破損皮膚侵入人體，主要通過直接接觸病例的病變皮膚或黏膜傳播，亦可通過接觸被病毒污染的物品、長(zhǎng)時(shí)間近距離吸入病例呼吸道飛沫傳播，接觸感染動(dòng)物的呼吸道分泌物、病變滲出物、血液及其它體液，或被感染動(dòng)物咬傷、抓傷感染傳播。

　　3.易感人群。人群普遍易感。接種過天花疫苗對(duì)猴痘病毒存在一定程度的交叉保護(hù)力。

　　4.疫情特征。2021年以前的猴痘疫情主要在中非和西非地區(qū)呈地方性流行，主要通過接觸感染動(dòng)物傳播，所引發(fā)的人傳人疫情傳播鏈較短，主要為兒童及青壯年的散發(fā)病例及聚集性疫情，通過家庭或旅行方式偶爾播散至其他國(guó)家和地區(qū)。2022年5月以來全球多國(guó)暴發(fā)的疫情主要在男男性行為人群（Men who have sex with men，簡(jiǎn)稱MSM，指與同性發(fā)生性行為的男性）中經(jīng)性接觸傳播，大部分病例為青壯年男性，通過大型聚會(huì)以及后續(xù)在社區(qū)的MSM擴(kuò)散，并傳播至全球多個(gè)國(guó)家和地區(qū)。

　　（三）臨床特征。

　　1.潛伏期：5-21天，多為6-13天。

　　2.傳染期：病例出現(xiàn)癥狀后至皮疹結(jié)痂自然脫落并形成新皮膚前具有傳染性。有調(diào)查提示一些病例可能在出現(xiàn)癥狀前1-4天存在傳染性。

　　3.早期癥狀：可出現(xiàn)發(fā)熱、頭痛、背痛、肌痛和淋巴結(jié)腫大等。

　　4.皮疹和黏膜疹：通常在熱退后出現(xiàn)，有些病例可出現(xiàn)在全身癥狀之前。皮疹發(fā)生常經(jīng)過斑疹、丘疹、水皰、膿皰、結(jié)痂至痂皮脫落幾個(gè)階段，不同形態(tài)皮疹可同時(shí)存在，可伴有明顯癢感和疼痛?？衫奂翱谇谎屎眇つぁ⒏亻T、生殖器、結(jié)膜和角膜等。痂皮脫落后可遺留紅斑或色素沉著甚至瘢痕，瘢痕持續(xù)時(shí)間可長(zhǎng)達(dá)數(shù)年。

　　5.病程及嚴(yán)重程度。猴痘病程約2—4周，免疫力低下患者的病程可能較長(zhǎng)。猴痘為自限性疾病，大多數(shù)病例癥狀會(huì)自行消失，也有重癥和死亡發(fā)生，主要為兒童、孕婦和免疫力低下人群。

　　2022年以來全球多國(guó)猴痘暴發(fā)疫情中，大多數(shù)病例臨床表現(xiàn)較輕，部分病例無全身癥狀，皮疹僅限于生殖器、肛門直腸黏膜部位，死亡病例主要為未得到治療的艾滋病病毒感染者等免疫力低下人群。2022年以來全球非地方性流行區(qū)病例的病死率約為0.1%。

　　三、宣傳教育與干預(yù)

　　針對(duì)重點(diǎn)人群、出入境人員和一般人群等不同人群分類開展宣傳教育，有針對(duì)性地加強(qiáng)不同人群的自我防范意識(shí)和個(gè)人防護(hù)措施，積極配合做好防控工作。

　　（一）重點(diǎn)人群。各地衛(wèi)生健康與疾控部門聯(lián)合相關(guān)社會(huì)組織，充分借鑒艾滋病防治綜合干預(yù)經(jīng)驗(yàn)和服務(wù)模式，在MSM經(jīng)常出入的酒吧、會(huì)所、浴池等重點(diǎn)活動(dòng)場(chǎng)所，開展同伴教育。借助大眾媒體、MSM社交網(wǎng)站等互聯(lián)網(wǎng)平臺(tái)，開展猴痘防控知識(shí)宣傳教育，提高重點(diǎn)人群防范意識(shí)，減少高危行為，引導(dǎo)有可疑接觸史者自覺做好自我健康監(jiān)測(cè)，增強(qiáng)主動(dòng)就診意識(shí)。

　　重點(diǎn)人群宣傳干預(yù)要求詳見附件1《重點(diǎn)人群宣傳干預(yù)指南》。

　　（二）出入境人員。通過發(fā)放宣傳資料等形式，加強(qiáng)出入境人員猴痘防控知識(shí)宣傳教育。提醒出境人員關(guān)注目的地國(guó)家和地區(qū)猴痘疫情信息，不接觸猴痘樣癥狀者及嚙齒類、靈長(zhǎng)類等動(dòng)物。提醒來自猴痘疫情報(bào)告國(guó)家和地區(qū)的人員，如在境外有可疑接觸史，入境后21天內(nèi)應(yīng)做好自我健康監(jiān)測(cè)，避免與他人發(fā)生密切接觸，一旦出現(xiàn)發(fā)熱、皮疹、淋巴結(jié)腫大等猴痘樣癥狀，應(yīng)主動(dòng)就診并如實(shí)報(bào)告流行病學(xué)史。

　　（三）一般人群。各地充分發(fā)揮新媒體以及廣播、電視、報(bào)紙等傳統(tǒng)媒體作用，開展猴痘防控知識(shí)宣傳教育，提高公眾科學(xué)防范意識(shí)。

　　四、疫情監(jiān)測(cè)和報(bào)告

　　（一）監(jiān)測(cè)病例定義。

　　1.猴痘樣癥狀者。不明原因急性皮疹（面部或口腔黏膜、四肢、生殖器或會(huì)陰、肛周等部位），伴發(fā)熱（＞37.3℃）或淋巴結(jié)腫大者。

　　2.疑似病例。猴痘樣癥狀者，發(fā)病前21天內(nèi)具備以下流行病學(xué)史中的任何一項(xiàng)：（1）有猴痘病例報(bào)告地區(qū)旅居史；（2）有猴痘確診病例或疑似病例接觸史；（3）有同性性行為，或性伴有同性性行為史；（4）有地方性流行區(qū)可疑動(dòng)物接觸史。

　　3.確診病例。猴痘樣癥狀者、疑似病例及密切接觸者，經(jīng)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)猴痘病毒核酸陽性或病毒分離陽性者。

　　（二）多渠道監(jiān)測(cè)。

　　1.醫(yī)療機(jī)構(gòu)監(jiān)測(cè)。各級(jí)各類醫(yī)療機(jī)構(gòu)要開展猴痘樣癥狀監(jiān)測(cè)，尤其是皮膚（性?。┛?、肛腸科、艾滋病自愿咨詢檢測(cè)門診等要重點(diǎn)關(guān)注猴痘樣癥狀者。發(fā)現(xiàn)猴痘樣癥狀者，應(yīng)主動(dòng)詢問流行病學(xué)史，記錄患者現(xiàn)住址及聯(lián)系方式，采集標(biāo)本送疾控機(jī)構(gòu)進(jìn)行猴痘核酸檢測(cè)。具備猴痘病毒檢測(cè)能力及猴痘病毒實(shí)驗(yàn)活動(dòng)資質(zhì)的醫(yī)療機(jī)構(gòu)也可開展檢測(cè)。

　　2.重點(diǎn)人群監(jiān)測(cè)。各級(jí)各類醫(yī)療機(jī)構(gòu)、疾控機(jī)構(gòu)在對(duì)MSM等重點(diǎn)人群開展診療或檢測(cè)咨詢服務(wù)時(shí)，應(yīng)主動(dòng)詢問是否有猴痘樣癥狀及其可疑接觸史。如發(fā)現(xiàn)猴痘樣癥狀者和疑似病例，應(yīng)及時(shí)采集標(biāo)本進(jìn)行猴痘病毒核酸檢測(cè)。

　　3.入境人員監(jiān)測(cè)。海關(guān)收到猴痘相關(guān)異常健康申報(bào)或檢疫發(fā)現(xiàn)有猴痘樣癥狀的入境人員，應(yīng)及時(shí)進(jìn)行標(biāo)本采集和核酸檢測(cè)，并發(fā)放《就診方便卡》，要求其盡快就診；對(duì)于核酸檢測(cè)陽性者，將相關(guān)信息通報(bào)轄區(qū)疾控機(jī)構(gòu)，由相關(guān)部門進(jìn)一步調(diào)查處置。

　　4.重點(diǎn)場(chǎng)所污水監(jiān)測(cè)。有條件的地區(qū)可根據(jù)當(dāng)?shù)匾咔樾蝿?shì)，經(jīng)評(píng)估對(duì)MSM經(jīng)常出入的酒吧、會(huì)所、浴池等重點(diǎn)活動(dòng)場(chǎng)所開展污水監(jiān)測(cè)。

　　（三）病例報(bào)告。

　　相關(guān)醫(yī)療機(jī)構(gòu)根據(jù)臨床表現(xiàn)、流行病學(xué)和實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)結(jié)果，及時(shí)對(duì)患者進(jìn)行診斷。

　　診斷的疑似病例和確診病例應(yīng)于24小時(shí)內(nèi)通過中國(guó)疾病預(yù)防控制信息系統(tǒng)的監(jiān)測(cè)報(bào)告管理模塊進(jìn)行網(wǎng)絡(luò)直報(bào)。如為境外輸入病例需填寫輸入來源國(guó)家或地區(qū)。不具備網(wǎng)絡(luò)直報(bào)條件的醫(yī)療衛(wèi)生機(jī)構(gòu)，需在規(guī)定時(shí)限內(nèi)將傳染病報(bào)告卡信息報(bào)告屬地鄉(xiāng)鎮(zhèn)衛(wèi)生院、社區(qū)衛(wèi)生服務(wù)中心或縣級(jí)疾控機(jī)構(gòu)進(jìn)行網(wǎng)絡(luò)報(bào)告，同時(shí)傳真或寄送傳染病報(bào)告卡至代報(bào)單位。負(fù)責(zé)病例網(wǎng)絡(luò)直報(bào)的醫(yī)療衛(wèi)生機(jī)構(gòu)，要根據(jù)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)結(jié)果、流調(diào)進(jìn)展及時(shí)對(duì)病例信息進(jìn)行復(fù)核、訂正。

　　各縣（市、區(qū)）出現(xiàn)首例猴痘確診病例或者2例及以上存在流行病學(xué)關(guān)聯(lián)的確診病例，應(yīng)當(dāng)在2小時(shí)內(nèi)通過突發(fā)公共衛(wèi)生事件報(bào)告管理信息系統(tǒng)報(bào)告，事件級(jí)別選擇“未分級(jí)”。

　　五、疫情處置

　　（一）病例管理。

　　各地發(fā)現(xiàn)猴痘疑似病例和確診病例應(yīng)當(dāng)及時(shí)轉(zhuǎn)運(yùn)至醫(yī)療機(jī)構(gòu)進(jìn)行隔離治療，如臨床癥狀明顯好轉(zhuǎn)，病變部位已結(jié)痂，可轉(zhuǎn)為居家隔離治療，直至皮疹結(jié)痂自然脫落，解除居家隔離。對(duì)病情較輕且具備居家隔離治療條件的確診病例，經(jīng)醫(yī)療機(jī)構(gòu)與疾控機(jī)構(gòu)聯(lián)合評(píng)估后，可直接采取居家隔離治療。對(duì)于實(shí)行居家隔離治療的確診病例發(fā)放《猴痘病例居家隔離治療健康告知書》（見附件2）。確診病例居家隔離治療期間，單人單間居住，避免與家人有皮膚或黏膜直接接觸，做好被污染物品的消毒，非必要不外出，確須外出時(shí)穿長(zhǎng)衣長(zhǎng)褲、佩戴醫(yī)用外科口罩，避免前往人群聚集場(chǎng)所，避免與其他人有皮膚或黏膜直接接觸；指定醫(yī)療機(jī)構(gòu)安排專人負(fù)責(zé)上門或電話隨訪，提供健康咨詢和醫(yī)療指導(dǎo)。

　　（二）流行病學(xué)調(diào)查。

　　縣（市、區(qū)）級(jí)疾控機(jī)構(gòu)接到轄區(qū)疑似病例和確診病例報(bào)告后，及時(shí)組織開展流行病學(xué)調(diào)查，查找感染來源，掌握、追蹤和管理密切接觸者，分析傳播鏈及傳播特征，及時(shí)發(fā)現(xiàn)潛在的風(fēng)險(xiǎn)人群及其范圍、特征，有針對(duì)性地開展宣傳教育和綜合干預(yù)。調(diào)查過程中發(fā)揮多部門聯(lián)防聯(lián)控的協(xié)同作用，盡可能獲取全面準(zhǔn)確的流調(diào)信息。

　　調(diào)查內(nèi)容主要包括病例基本信息、發(fā)病就診情況、臨床表現(xiàn)、轉(zhuǎn)歸及實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)；發(fā)病前21天內(nèi)與可疑感染來源的接觸史、接觸場(chǎng)所及接觸方式；發(fā)病后至隔離治療前的具體活動(dòng)地點(diǎn)、與其有皮膚或黏膜直接接觸者，以及發(fā)病前4天內(nèi)與其有性接觸者。

　　猴痘疫情流行病學(xué)調(diào)查要求詳見附件3《猴痘疫情流行病學(xué)調(diào)查指南》。

　　（三）密切接觸者的判定和管理。

　　1.密切接觸者定義。直接接觸病例的病變部位及其被污染物品，或感染動(dòng)物及其分泌物、滲出物等污染物；以及職業(yè)暴露或長(zhǎng)時(shí)間近距離吸入病例呼吸道飛沫等，經(jīng)評(píng)估有感染風(fēng)險(xiǎn)的人員。

　　2.密切接觸者判定。根據(jù)流行病學(xué)調(diào)查及暴露風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估結(jié)果，疾控機(jī)構(gòu)負(fù)責(zé)及時(shí)對(duì)密切接觸者進(jìn)行判定。

　　3.密切接觸者管理。疾控機(jī)構(gòu)或基層醫(yī)療衛(wèi)生機(jī)構(gòu)指導(dǎo)密切接觸者做好自我健康監(jiān)測(cè)，健康監(jiān)測(cè)期限為最后密切接觸之日起21天。

　　密切接觸者自我健康監(jiān)測(cè)期間可正常生活與工作，需避免與他人發(fā)生性接觸等密切接觸，避免捐獻(xiàn)血液等；堅(jiān)持每天做好體溫測(cè)量和癥狀監(jiān)測(cè)，出現(xiàn)猴痘樣癥狀應(yīng)及時(shí)就診并主動(dòng)報(bào)告可疑接觸史。轄區(qū)疾控機(jī)構(gòu)或基層醫(yī)療衛(wèi)生機(jī)構(gòu)應(yīng)在密切接觸者自我健康監(jiān)測(cè)第7、14、21天上門或電話對(duì)其進(jìn)行隨訪，提供咨詢指導(dǎo)，發(fā)現(xiàn)異常情況及時(shí)進(jìn)行處置。

　　密切接觸者判定管理要求詳見附件4《猴痘密切接觸者判定和管理指南》。

　　（四）消毒與人員防護(hù)。

　　做好病例衣物、毛巾、床單、餐具等個(gè)人用品，以及可能被病例分泌物、滲出物、體液等污染的環(huán)境和物體表面的消毒。從事病例診治護(hù)理、流行病學(xué)調(diào)查、環(huán)境清潔消毒、標(biāo)本采集和實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)等工作人員在工作期間做好個(gè)人防護(hù)。

　　消毒與人員防護(hù)要求詳見附件5《猴痘消毒技術(shù)指南》和附件6《猴痘個(gè)人防護(hù)指南》。

　　六、實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)

　　猴痘病毒核酸檢測(cè)首選皮膚或黏膜病變部位標(biāo)本，可同時(shí)采集口咽拭子標(biāo)本。各省首例猴痘確診病例標(biāo)本應(yīng)送中國(guó)疾控中心病毒病所進(jìn)行復(fù)核；本土疫情中的首發(fā)或早期確診病例、與早期病例有流行病學(xué)關(guān)聯(lián)的關(guān)鍵確診病例、感染來源不明的本土確診病例、境外輸入確診病例陽性標(biāo)本等，熒光定量PCR檢測(cè)Ct值≤32時(shí)進(jìn)行病毒基因測(cè)序。所有測(cè)序原始數(shù)據(jù)、組裝序列及測(cè)序樣本送檢單應(yīng)在獲得序列48小時(shí)內(nèi)報(bào)送中國(guó)疾控中心病毒病所進(jìn)行匯總、分析。以上確診病例應(yīng)至少采集一套標(biāo)本（包括核酸檢測(cè)陽性者的皮膚或黏膜病變標(biāo)本、口咽拭子標(biāo)本以及發(fā)病急性期和恢復(fù)期雙份血清）送中國(guó)疾控中心病毒病所。

　　實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)具體要求詳見附件7《猴痘病毒實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)技術(shù)指南》。

　　七、院內(nèi)感染控制

　　醫(yī)療機(jī)構(gòu)應(yīng)當(dāng)嚴(yán)格做好院內(nèi)感染控制。疑似病例和確診病例應(yīng)安置在隔離病房，疑似病例單間隔離。醫(yī)務(wù)人員執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)預(yù)防，采取經(jīng)接觸傳播和經(jīng)飛沫傳播疾病的隔離與預(yù)防措施，佩戴一次性乳膠手套、KN95/N95及以上級(jí)別的口罩、防護(hù)面屏或護(hù)目鏡、一次性隔離衣等，同時(shí)做好手衛(wèi)生。嚴(yán)格按照《醫(yī)療機(jī)構(gòu)消毒技術(shù)規(guī)范》對(duì)病例的體液、血液、排泄物、分泌物等進(jìn)行規(guī)范處理，做好診療環(huán)境（空氣、物體表面、地面等）、醫(yī)療器械、病例使用物品等的清潔消毒。根據(jù)《醫(yī)療廢物管理?xiàng)l例》《醫(yī)療衛(wèi)生機(jī)構(gòu)醫(yī)療廢物管理辦法》做好醫(yī)療廢物的處置和管理。

　　八、工作要求

　　（一）加強(qiáng)組織協(xié)調(diào)。各地衛(wèi)生健康、疾控部門加強(qiáng)與海關(guān)等有關(guān)部門的密切協(xié)作和信息共享，及時(shí)發(fā)現(xiàn)與處置猴痘疫情，落實(shí)猴痘病例發(fā)現(xiàn)、疫情報(bào)告、診療隔離、密切接觸者追蹤管理等工作，防止疫情擴(kuò)散和蔓延。各地在猴痘疫情防控過程中應(yīng)注意保護(hù)病例、密切接觸者和重點(diǎn)人群等個(gè)人隱私。

　　（二）加強(qiáng)宣傳引導(dǎo)。各地要及時(shí)發(fā)布轄區(qū)猴痘疫情相關(guān)信息，做好政策解讀和公眾健康提示。通過多種方式和渠道開展猴痘防控知識(shí)宣傳，加強(qiáng)重點(diǎn)人群宣傳教育的針對(duì)性和實(shí)效性。及時(shí)回應(yīng)社會(huì)關(guān)切，引導(dǎo)公眾科學(xué)認(rèn)識(shí)猴痘。

　　（三）加強(qiáng)人員培訓(xùn)。各地要加強(qiáng)對(duì)各級(jí)疾控機(jī)構(gòu)和醫(yī)療機(jī)構(gòu)專業(yè)人員的培訓(xùn)。對(duì)醫(yī)務(wù)人員重點(diǎn)開展猴痘病例的識(shí)別與診斷、病例發(fā)現(xiàn)與報(bào)告、病例管理等相關(guān)知識(shí)培訓(xùn)，強(qiáng)化診治意識(shí)。對(duì)疾控人員重點(diǎn)開展流行病學(xué)調(diào)查、密切接觸者的判定和管理、實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)、重點(diǎn)人群宣傳干預(yù)等相關(guān)知識(shí)培訓(xùn)，提高猴痘疫情防控和應(yīng)急處置能力。

　　附件：

　　1.重點(diǎn)人群宣傳干預(yù)指南

　　2.猴痘病例居家隔離治療健康告知書

　　3.猴痘疫情流行病學(xué)調(diào)查指南

　　4.猴痘密切接觸者判定和管理指南

　　5.猴痘消毒技術(shù)指南

　　6.猴痘個(gè)人防護(hù)指南

　　7.猴痘病毒實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)技術(shù)指南   

　　附件1

　　重點(diǎn)人群宣傳干預(yù)指南

　　2022年5月以來，全球非地方性流行區(qū)發(fā)生的猴痘疫情以男男性行為人群（MSM）為主。為充分利用我國(guó)艾滋病防治綜合干預(yù)服務(wù)體系，開展MSM等重點(diǎn)人群宣傳干預(yù)，防范猴痘疫情傳播擴(kuò)散，形成常態(tài)化艾滋病與猴痘綜合防控一體化應(yīng)對(duì)機(jī)制，制定本指南。

　　一、實(shí)施策略

　　在現(xiàn)有艾滋病防治綜合干預(yù)服務(wù)體系基礎(chǔ)上，綜合運(yùn)用行為學(xué)干預(yù)方法和手段，通過宣傳教育、促進(jìn)安全性行為、動(dòng)員檢測(cè)、外展服務(wù)、同伴教育和互聯(lián)網(wǎng)干預(yù)等，從個(gè)體、群體和社會(huì)等多個(gè)層面為目標(biāo)人群提供猴痘綜合干預(yù)服務(wù)。

　　二、組織實(shí)施

　　各級(jí)醫(yī)療機(jī)構(gòu)和疾控機(jī)構(gòu)要加強(qiáng)重點(diǎn)科室和艾滋病自愿咨詢檢測(cè)門診工作人員猴痘知識(shí)培訓(xùn)，對(duì)重點(diǎn)人群提供猴痘防控知識(shí)宣傳、檢測(cè)咨詢與動(dòng)員、治療和關(guān)懷等服務(wù)。各級(jí)疾控機(jī)構(gòu)應(yīng)當(dāng)積極推動(dòng)當(dāng)?shù)赜心芰Α⒕哂辛己冒滩》乐谓?jīng)驗(yàn)的MSM志愿者或社會(huì)組織共同參與猴痘防治宣傳工作，在工作過程中注意保護(hù)重點(diǎn)人群個(gè)人隱私。

　　三、形勢(shì)分析

　　各地要加強(qiáng)對(duì)重點(diǎn)人群猴痘疫情、防控現(xiàn)狀、影響因素及出入境情況的調(diào)查，及時(shí)分析研判猴痘疫情形勢(shì)，為制定本地高危行為干預(yù)工作計(jì)劃提供依據(jù)。具體內(nèi)容包括：1.重點(diǎn)人群基數(shù)、活動(dòng)形式和特點(diǎn)、活動(dòng)場(chǎng)所、出入境的時(shí)間及地區(qū)等；2.猴痘知識(shí)、態(tài)度和高危行為；3.猴痘疫情水平及其影響因素；4.猴痘防治政策及專業(yè)機(jī)構(gòu)已開展的工作；5.包括志愿者在內(nèi)的有關(guān)組織和個(gè)人已開展的干預(yù)活動(dòng)；6.影響猴痘防治工作的困難和問題。

　　四、宣傳干預(yù)

　　（一）宣傳教育。各級(jí)疾控機(jī)構(gòu)或健康教育專業(yè)機(jī)構(gòu)提供技術(shù)支持，社會(huì)組織參與，共同研究制定適合當(dāng)?shù)靥攸c(diǎn)的猴痘預(yù)防宣傳材料，加強(qiáng)警示宣傳教育。通過大眾媒體、MSM網(wǎng)站和以移動(dòng)終端為載體的交友軟件等平臺(tái)，宣傳國(guó)際、國(guó)內(nèi)及本地猴痘疫情信息和防控知識(shí)，提高重點(diǎn)人群猴痘防范意識(shí)。

　　（二）同伴教育。各級(jí)疾控機(jī)構(gòu)要加強(qiáng)同伴教育員挑選、招募和培訓(xùn)，組織和支持同伴宣傳活動(dòng)，增強(qiáng)人群猴痘風(fēng)險(xiǎn)防范意識(shí)，推動(dòng)主動(dòng)檢測(cè)。定期組織同伴教育員工作例會(huì)，了解猴痘干預(yù)工作存在的困難和問題，有針對(duì)性地給予幫助和支持。

　　（三）外展服務(wù)。各級(jí)疾控機(jī)構(gòu)干預(yù)工作人員定期到重點(diǎn)人群活動(dòng)場(chǎng)所開展猴痘宣傳、咨詢、發(fā)放宣傳材料等外展服務(wù)活動(dòng)，提高重點(diǎn)人群猴痘防范意識(shí)和知識(shí)水平，推動(dòng)重點(diǎn)人群加強(qiáng)自我健康管理，主動(dòng)尋求檢測(cè)咨詢服務(wù)。

　　（四）檢測(cè)咨詢。各級(jí)疾控機(jī)構(gòu)通過互聯(lián)網(wǎng)、同伴教育、外展活動(dòng)等多種形式動(dòng)員有猴痘樣癥狀或可疑接觸史的重點(diǎn)人群進(jìn)行猴痘檢測(cè)。各級(jí)各類醫(yī)療機(jī)構(gòu)皮膚（性?。┛啤⒏啬c科、艾滋病自愿咨詢檢測(cè)門診發(fā)現(xiàn)猴痘樣癥狀者，應(yīng)主動(dòng)詢問其流行病學(xué)史及性接觸史，記錄患者現(xiàn)住址及聯(lián)系方式，采集標(biāo)本送疾控機(jī)構(gòu)進(jìn)行猴痘核酸檢測(cè)，具備猴痘檢測(cè)能力及猴痘病毒實(shí)驗(yàn)活動(dòng)資質(zhì)的醫(yī)療機(jī)構(gòu)也可開展檢測(cè)。對(duì)于已建立互聯(lián)網(wǎng)+HIV檢測(cè)平臺(tái)的地區(qū)，可增加猴痘檢測(cè)內(nèi)容，實(shí)現(xiàn)互聯(lián)網(wǎng)在線檢測(cè)預(yù)約和結(jié)果查詢。

　　五、重點(diǎn)場(chǎng)所干預(yù)

　　重點(diǎn)活動(dòng)場(chǎng)所包括實(shí)體和虛擬兩類場(chǎng)所，實(shí)體場(chǎng)所包括酒吧、會(huì)所、浴池等經(jīng)營(yíng)性場(chǎng)所，虛擬場(chǎng)所包括移動(dòng)互聯(lián)網(wǎng)和社交媒體。

　　（一）實(shí)體場(chǎng)所干預(yù)。

　　各級(jí)疾控機(jī)構(gòu)負(fù)責(zé)組織干預(yù)工作人員在當(dāng)?shù)豈SM經(jīng)常出入的酒吧、會(huì)所、浴池等活動(dòng)場(chǎng)所，開展猴痘預(yù)防干預(yù)宣傳，主要包括：

　　1.在MSM經(jīng)常出入的酒吧、會(huì)所、浴池等實(shí)體場(chǎng)所，張貼醒目的健康教育宣傳圖片，設(shè)置健康教育資料公告欄；

　　2.強(qiáng)化個(gè)人健康責(zé)任意識(shí)，開展猴痘健康咨詢，推動(dòng)開展自我風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估；

　　3.提供轉(zhuǎn)介服務(wù)信息，告知明確的診療流程以及相關(guān)檢測(cè)、醫(yī)療機(jī)構(gòu)名稱、聯(lián)系人等信息。

　　各地要加強(qiáng)對(duì)猴痘確診病例發(fā)病前21天內(nèi)活動(dòng)過的場(chǎng)所以及污水監(jiān)測(cè)陽性場(chǎng)所的干預(yù)宣傳，重視目標(biāo)人群的個(gè)人隱私保護(hù)，加強(qiáng)對(duì)社會(huì)組織同伴教育員猴痘防治知識(shí)培訓(xùn)，建立規(guī)范的行為干預(yù)流程，提高自我防護(hù)技能。

　　（二）虛擬場(chǎng)所干預(yù)。

　　各級(jí)疾控機(jī)構(gòu)負(fù)責(zé)組織指導(dǎo)當(dāng)?shù)赜行蜷_展猴痘線上宣傳，在相關(guān)網(wǎng)站、社交媒體平臺(tái)及時(shí)發(fā)布和更新猴痘宣傳教育內(nèi)容，形成面向重點(diǎn)人群的猴痘檢測(cè)-咨詢-診療的線上宣傳干預(yù)服務(wù)體系。

　　各級(jí)疾控機(jī)構(gòu)支持社會(huì)組織或同伴教育員利用網(wǎng)站、信箱或社交媒體平臺(tái)，組織開展在線咨詢和交流。及時(shí)解答網(wǎng)友提出的各種猴痘相關(guān)問題。針對(duì)不同時(shí)期猴痘傳播特點(diǎn)，定期或不定期組織專家、專業(yè)人員、同伴教育員利用互聯(lián)網(wǎng)和社交媒體平臺(tái)進(jìn)行在線宣教。各級(jí)疾控機(jī)構(gòu)要定期指導(dǎo)更新相關(guān)專業(yè)信息，確保宣傳內(nèi)容科學(xué)、有效。

　　附件2

　　附件3

　　猴痘疫情流行病學(xué)調(diào)查指南

　　為指導(dǎo)各地疾控機(jī)構(gòu)規(guī)范開展猴痘疑似病例、確診病例和聚集性疫情的流行病學(xué)調(diào)查，及時(shí)掌握病例暴露史、接觸史等流行病學(xué)相關(guān)信息，落實(shí)密切接觸者的追蹤判定，防止疫情傳播擴(kuò)散，制定本指南。

　　一、調(diào)查目的

　　（一）查找感染來源，掌握、追蹤和管理密切接觸者。

　　（二）分析傳播鏈及傳播特征。

　　（三）及時(shí)發(fā)現(xiàn)潛在的風(fēng)險(xiǎn)人群及其特征、范圍，有針對(duì)性地開展宣傳教育和綜合干預(yù)。

　　二、調(diào)查對(duì)象

　　疑似病例、確診病例和聚集性疫情。

　　三、調(diào)查方法和內(nèi)容

　　通過查閱資料，詢問病例、診治醫(yī)生、家屬和知情人等進(jìn)行流行病學(xué)調(diào)查。如病例的病情允許，調(diào)查時(shí)應(yīng)先調(diào)查病例本人，再對(duì)其診治醫(yī)生、家屬和知情者進(jìn)行調(diào)查。

　　開展個(gè)案調(diào)查時(shí)，要認(rèn)真、詳細(xì)了解和記錄病例基本信息、發(fā)病就診情況、臨床表現(xiàn)、轉(zhuǎn)歸及實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)信息；發(fā)病前21天內(nèi)與可疑感染來源的接觸史、接觸場(chǎng)所及接觸方式；發(fā)病后至隔離治療前的具體活動(dòng)地點(diǎn)、與其有皮膚或黏膜直接接觸者，以及發(fā)病前4天內(nèi)與其有性接觸者。

　　（一）基本情況。如姓名、性別、年齡、住址、國(guó)籍、聯(lián)系方式等。

　　（二）發(fā)病就診情況。臨床表現(xiàn)、實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)、發(fā)病就診經(jīng)過和病情變化與轉(zhuǎn)歸。

　　（三）感染來源調(diào)查。對(duì)病例發(fā)病前21天內(nèi)的暴露史開展調(diào)查，包括境內(nèi)外猴痘病例報(bào)告地區(qū)旅行史或居住史，對(duì)可疑的感染來源要詳細(xì)詢問接觸時(shí)間、方式、頻次、地點(diǎn)及接觸時(shí)采取的防護(hù)措施等，特別是性接觸史。調(diào)查時(shí)，若發(fā)現(xiàn)調(diào)查表中未列入，但具備重要流行病學(xué)意義的內(nèi)容也應(yīng)進(jìn)行詳細(xì)詢問和記錄。

　　（四）密切接觸者調(diào)查及判定。對(duì)病例傳染期的活動(dòng)情況和人群接觸情況進(jìn)行追蹤和排查后，判定其密切接觸者。密切接觸者判定和管理按照《猴痘密切接觸者判定和管理指南》（附件4）執(zhí)行。

　　詳見附件3-1《猴痘病例個(gè)案調(diào)查表》。

　　四、組織與實(shí)施

　　按照“屬地化管理”原則，由病例現(xiàn)住址所在的縣（市、區(qū)）級(jí)疾控部門組織轄區(qū)疾控機(jī)構(gòu)開展猴痘病例的流行病學(xué)調(diào)查，就診醫(yī)療機(jī)構(gòu)提供診療信息。調(diào)查單位應(yīng)根據(jù)調(diào)查計(jì)劃和調(diào)查目的，確定調(diào)查人員組成和職責(zé)分工，及時(shí)開展病例流行病學(xué)個(gè)案調(diào)查。調(diào)查過程中發(fā)揮多部門聯(lián)防聯(lián)控的協(xié)同作用，盡可能獲取全面準(zhǔn)確的流調(diào)信息。調(diào)查期間，調(diào)查人員要做好個(gè)人防護(hù)。

　　五、信息的上報(bào)與分析

　　疾控機(jī)構(gòu)完成調(diào)查后，應(yīng)做好病例分析總結(jié)，及時(shí)將流行病學(xué)個(gè)案調(diào)查表、調(diào)查報(bào)告等資料逐級(jí)報(bào)送上級(jí)疾控機(jī)構(gòu)，并做好調(diào)查資料的保管和存檔。病例流調(diào)信息要按有關(guān)規(guī)定，嚴(yán)格做好信息安全和個(gè)人隱私信息保護(hù)。

　　附件：3-1.猴痘病例個(gè)案調(diào)查表

　　附件4

　　猴痘密切接觸者判定和管理指南

　　為指導(dǎo)各地做好猴痘密切接觸者判定和管理，有效控制猴痘疫情的傳播，制定本指南。

　　一、密切接觸者判定標(biāo)準(zhǔn)

　　密切接觸者是指直接接觸病例的病變部位及其被污染物品，或感染動(dòng)物及其分泌物、滲出物等污染物的人員；以及職業(yè)暴露或長(zhǎng)時(shí)間近距離吸入病例呼吸道飛沫等，經(jīng)評(píng)估有感染風(fēng)險(xiǎn)的人員。具體情形包括：

　　1.與疑似病例或確診病例發(fā)病后有皮膚或黏膜直接接觸的人員，接觸方式包括性接觸、撫摸、擁抱和親吻等；

　　2.與有皮疹癥狀的疑似病例或確診病例共用衣物、被褥、餐具等物品的人員；

　　3.醫(yī)療診療、采樣或?qū)嶒?yàn)室檢測(cè)等操作過程中可能暴露于病毒，經(jīng)評(píng)估有感染風(fēng)險(xiǎn)的醫(yī)療衛(wèi)生工作人員；

　　4.與疑似病例或確診病例發(fā)病前4天內(nèi)有性接觸，并經(jīng)流行病學(xué)調(diào)查專業(yè)人員評(píng)估有感染風(fēng)險(xiǎn)的人員，亦可判定為密切接觸者；

　　5.在狹小密閉空間與疑似病例或確診病例長(zhǎng)時(shí)間近距離接觸（如長(zhǎng)時(shí)間共處同一封閉空間），經(jīng)流行病學(xué)調(diào)查專業(yè)人員評(píng)估有感染風(fēng)險(xiǎn)的人員，亦可判定為密切接觸者；

　　6.接觸感染猴痘病毒的動(dòng)物及其分泌物、滲出物等污染物，而未采取有效個(gè)人防護(hù)的人員；

　　7.其他可能存在病毒暴露風(fēng)險(xiǎn)的人員。

　　二、密切接觸者管理

　　1.管理期限與方式。病例發(fā)現(xiàn)地疾控機(jī)構(gòu)或密切接觸者所在地疾控機(jī)構(gòu)應(yīng)于追蹤到密切接觸者當(dāng)天及時(shí)開展猴痘病毒核酸檢測(cè)，通知并指導(dǎo)密切接觸者做好自我健康監(jiān)測(cè)，健康監(jiān)測(cè)期限為自最后密切接觸之日算起21天。自我健康監(jiān)測(cè)期間可正常生活與工作，需避免與他人發(fā)生性接觸等密切接觸，避免捐獻(xiàn)血液等。

　　2.知情告知。實(shí)施健康監(jiān)測(cè)時(shí)，疾控機(jī)構(gòu)或基層醫(yī)療衛(wèi)生機(jī)構(gòu)應(yīng)口頭告知健康監(jiān)測(cè)的緣由、期限、注意事項(xiàng)和疾病相關(guān)知識(shí)，以及負(fù)責(zé)隨訪疾控機(jī)構(gòu)或基層醫(yī)療衛(wèi)生機(jī)構(gòu)聯(lián)系人和聯(lián)系方式，并發(fā)放《猴痘密切接觸者健康告知書》。

　　3.定期隨訪。疾控機(jī)構(gòu)或基層醫(yī)療衛(wèi)生機(jī)構(gòu)應(yīng)在第7、14、21天電話或上門主動(dòng)詢問密切接觸者自我健康監(jiān)測(cè)情況，提供咨詢指導(dǎo)建議。發(fā)現(xiàn)異常情況，及時(shí)調(diào)查處置。

　　4.自我健康監(jiān)測(cè)。堅(jiān)持每天做好體溫測(cè)量和癥狀監(jiān)測(cè)，主要癥狀包括發(fā)熱（＞37.3℃）、皮疹、淺表淋巴結(jié)腫大等。密切接觸者一旦出現(xiàn)相關(guān)癥狀應(yīng)及時(shí)前往醫(yī)療機(jī)構(gòu)就診或與隨訪聯(lián)系人取得聯(lián)系，接受猴痘病毒核酸檢測(cè)。

　　附件：4-1.猴痘密切接觸者健康告知書

　　附件5

　　猴痘消毒技術(shù)指南

　　為進(jìn)一步規(guī)范猴痘疫情相關(guān)的消毒工作，落實(shí)科學(xué)消毒、精準(zhǔn)消毒，減少猴痘病毒對(duì)公眾健康造成的危害，制定本指南。

　　一、疫源地消毒

　　（一）適用范圍。

　　適用于出現(xiàn)猴痘病例后，對(duì)其可能污染的場(chǎng)所和物品進(jìn)行的隨時(shí)消毒和終末消毒。

　　（二）消毒原則。

　　1.范圍和對(duì)象確定。

　　根據(jù)流行病學(xué)調(diào)查結(jié)果，確定現(xiàn)場(chǎng)消毒的范圍和對(duì)象。對(duì)病例在住院、轉(zhuǎn)運(yùn)期間可能污染的環(huán)境和物品，進(jìn)行隨時(shí)消毒。對(duì)病例居住或活動(dòng)過的場(chǎng)所，如居住場(chǎng)所、工作場(chǎng)所、學(xué)習(xí)場(chǎng)所、診療場(chǎng)所、轉(zhuǎn)運(yùn)工具，及其他可能受到污染的場(chǎng)所，在其離開后（如住院、轉(zhuǎn)院、出院、死亡）進(jìn)行終末消毒。

　　2.方法選擇。

　　（1）診療用品消毒。盡量選擇一次性診療用品，非一次性診療用品應(yīng)首選壓力蒸汽滅菌，不耐熱物品可選擇化學(xué)消毒劑或低溫滅菌設(shè)備進(jìn)行消毒或滅菌。

　　（2）手消毒。建議使用手消毒劑揉搓雙手進(jìn)行消毒，也可選擇75%乙醇、過氧化氫等消毒劑。

　　（3）環(huán)境和物體表面消毒?？蛇x擇含氯消毒劑、二氧化氯、過氧乙酸、過氧化氫等消毒劑擦拭、噴灑或浸泡消毒。

　　（4）衣物、床單等紡織品消毒?？蛇x擇熱力消毒、含氯消毒劑或季銨鹽類消毒劑浸泡等消毒方式。

　　（三）常見污染對(duì)象的消毒方法。

　　1.手消毒。

　　可選用速干手消毒劑，或直接選用75%乙醇進(jìn)行擦拭消毒；醇類過敏者，可選擇季銨鹽類等有效的非醇類手消毒劑。有肉眼可見污染物時(shí)，應(yīng)先使用洗手液（或肥皂）在流動(dòng)水下按照六步洗手法清洗雙手，然后按上述方法消毒。

　　2.皮膚、黏膜。

　　皮膚被污染物污染時(shí)，應(yīng)立即清除污染物，再用一次性吸水材料沾取0.5%碘伏或過氧化氫消毒劑擦拭消毒3分鐘以上，使用清水清洗干凈；粘膜應(yīng)用大量生理鹽水沖洗或0.05%碘伏沖洗消毒。

　　3.床單、毛巾、衣服等紡織品。

　　病例使用的床單、毛巾、衣服等紡織品，無肉眼可見污染物時(shí)，若需重復(fù)使用，可用流通蒸汽或煮沸消毒30分鐘；或用有效氯500mg/L的含氯消毒劑或1000mg/L的季銨鹽類消毒劑浸泡30分鐘后，按照常規(guī)清洗；或用其他有效的消毒方法。不耐濕的衣物可選用環(huán)氧乙烷或干熱方法進(jìn)行消毒處理。

　　有分泌物、滲出液、排泄物、血液、體液等污染物時(shí)，建議按醫(yī)療廢物集中處理。

　　4.餐（飲）具。

　　病例所使用的碗、盤、筷、杯等餐（飲）具清除食物殘?jiān)螅蠓邢?0分鐘，或使用有效氯500mg/L的含氯消毒劑浸泡30分鐘后，再用清水洗凈。

　　5.污染物。

　　對(duì)病例分泌物、滲出液、排泄物、血液、體液等少量污染物可用一次性吸水材料（如紗布、抹布等）沾取有效氯5000-10000mg/L的含氯消毒劑（或能達(dá)到高水平消毒的消毒濕巾/干巾）小心移除。

　　對(duì)病例分泌物、滲出液、排泄物、血液、體液等大量污染物應(yīng)使用含吸水成分的消毒粉或漂白粉完全覆蓋，或用一次性吸水材料完全覆蓋后用足量的有效氯5000-10000mg/L的含氯消毒劑澆在吸水材料上，作用30分鐘以上（或能達(dá)到高水平消毒的消毒干巾），小心清除干凈。清除過程中避免接觸污染物，清理的污染物按醫(yī)療廢物集中處置。

　　病例的分泌物等應(yīng)有專門容器收集，用有效氯20000mg/L的含氯消毒劑，按物、藥比例1:2浸泡消毒2小時(shí)。

　　清除污染物后，應(yīng)對(duì)污染的環(huán)境和物體表面進(jìn)行消毒。盛放污染物的容器可用有效氯5000mg/L的含氯消毒劑溶液浸泡消毒30分鐘，然后清洗干凈。

　　6.地面、墻壁。

　　有肉眼可見污染物時(shí)，應(yīng)先完全清除污染物再消毒。無肉眼可見污染物時(shí)，可用有效氯1000mg/L的含氯消毒劑或500mg/L的二氧化氯消毒劑擦拭或噴灑消毒；不耐腐蝕的地面和墻壁，也可用2000mg/L的季銨鹽類消毒劑噴灑或擦拭；消毒作用時(shí)間不少于30分鐘。

　　7.物體表面。

　　診療設(shè)施設(shè)備表面以及床圍欄、床頭柜、家具、門把手、衛(wèi)生潔具和家居用品等有肉眼可見污染物時(shí)，應(yīng)先完全清除污染物再消毒。無肉眼可見污染物時(shí)，用有效氯1000mg/L的含氯消毒劑或500mg/L的二氧化氯消毒劑，不耐腐蝕的物體表面也可用2000mg/L的季銨鹽類消毒劑進(jìn)行噴灑、擦拭或浸泡消毒，作用30分鐘后清水擦拭干凈。

　　8.污水和糞便。

　　在進(jìn)入市政排水管網(wǎng)前需進(jìn)行消毒處理，消毒后污水應(yīng)當(dāng)符合《醫(yī)療機(jī)構(gòu)水污染物排放標(biāo)準(zhǔn)》（GB18466-2005）。

　　9.病例生活垃圾。

　　病例生活垃圾按醫(yī)療廢物處理。

　　10.醫(yī)療廢物。

　　醫(yī)療廢物的處置應(yīng)遵循《醫(yī)療廢物管理?xiàng)l例》和《醫(yī)療衛(wèi)生機(jī)構(gòu)醫(yī)療廢物管理辦法》的要求，規(guī)范使用雙層黃色醫(yī)療廢物收集袋封裝后，按常規(guī)流程進(jìn)行處置。

　　11.室內(nèi)空氣。

　　如經(jīng)科學(xué)評(píng)估，需對(duì)室內(nèi)空氣進(jìn)行消毒，則在無人情況下，可選擇5000mg/L過氧乙酸、3%過氧化氫、二氧化氯（濃度按產(chǎn)品說明書）等消毒劑，按20mL/m³用超低容量（氣溶膠）噴霧法進(jìn)行消毒。也可采用經(jīng)驗(yàn)證安全有效的其他消毒方法。

　　二、注意事項(xiàng)

　　現(xiàn)場(chǎng)消毒應(yīng)確保所用消毒產(chǎn)品合法有效，所選消毒方法科學(xué)可行?，F(xiàn)場(chǎng)消毒時(shí)，根據(jù)現(xiàn)場(chǎng)情況和相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)要求，選擇合格有效的個(gè)人防護(hù)裝備，在做好個(gè)人防護(hù)的前提下，嚴(yán)格按照工作方案實(shí)施消毒。

　　消毒實(shí)施單位應(yīng)具備現(xiàn)場(chǎng)消毒能力，操作人員應(yīng)經(jīng)過消毒專業(yè)培訓(xùn)，掌握消毒和個(gè)人防護(hù)基本知識(shí)，熟悉消毒器械的使用和消毒劑的配制等。

　　每次開展消毒工作時(shí)均應(yīng)做好消毒記錄，包括消毒對(duì)象、消毒面積（體積）、消毒劑濃度（或消毒器械強(qiáng)度）、劑量、作用時(shí)間等。同時(shí)，相關(guān)部門和單位應(yīng)做好消毒工作的監(jiān)督管理和評(píng)價(jià)。

　　附件6

　　猴痘個(gè)人防護(hù)指南

　　為加強(qiáng)公眾、疫情處置相關(guān)工作人員和醫(yī)務(wù)人員的個(gè)人防護(hù)，避免猴痘病毒暴露感染，制定本指南。

　　一、居家隔離治療的病例等相關(guān)人員

　　（一）適用范圍。

　　適用于居家隔離治療的病例（疑似病例和確診病例）、照護(hù)人員或共同居住者的個(gè)人防護(hù)。

　　（二）居家隔離區(qū)域要求。

　　1.應(yīng)選擇有自然通風(fēng)、獨(dú)立衛(wèi)生間的房間作為隔離區(qū)域。

　　2.應(yīng)配備專用的餐具，床單、毛巾等床上用品，消毒劑和口罩等個(gè)人防護(hù)用品，電視和平板電腦等電子設(shè)備。

　　3.衛(wèi)生間宜配備專用的洗衣機(jī)，地漏應(yīng)有水封。

　　（三）病例管理要求。

　　1.應(yīng)能夠進(jìn)行自我照護(hù)。

　　2.應(yīng)每天做好體溫測(cè)量和癥狀監(jiān)測(cè)，避免與他人共用個(gè)人物品。

　　3.避免與他人發(fā)生性接觸，避免與免疫力低下人員、兒童、老人、孕婦及其他人員的直接接觸，避免與寵物等動(dòng)物接觸，避免捐獻(xiàn)血液等。

　　4.外出就診時(shí)，應(yīng)佩戴醫(yī)用外科口罩，著長(zhǎng)衣長(zhǎng)褲，確保遮住所有損傷皮膚，避免與他人密切接觸，避免乘坐公共交通工具。

　　（四）照護(hù)人員要求。

　　1.應(yīng)每天做好體溫測(cè)量和癥狀監(jiān)測(cè)。

　　2.應(yīng)盡量避免進(jìn)入隔離區(qū)域。如需進(jìn)入隔離區(qū)域，應(yīng)佩戴醫(yī)用外科口罩和一次性手套，與病例保持至少1米的距離。在離開隔離區(qū)域之后，應(yīng)加強(qiáng)手衛(wèi)生，并對(duì)脫下的口罩和手套進(jìn)行消毒處理后廢棄。

　　3.在拿放和清洗居家隔離治療病例的床單、衣服和處理垃圾的過程中，應(yīng)避免抖動(dòng)。用濕拖布拖地，避免干掃。用濕抹布清潔家居用品表面，地毯應(yīng)用蒸汽清洗，避免使用吸塵器。

　　4.應(yīng)將居家隔離治療病例的餐具、床單、毛巾和衣物單獨(dú)洗滌和消毒，可選擇熱力消毒、含氯消毒劑或季銨鹽類消毒劑浸泡等消毒方式。

　　（五）應(yīng)急處置。

　　1.照護(hù)人員或共同居住者出現(xiàn)任何癥狀或不適表現(xiàn)，應(yīng)當(dāng)及時(shí)前往指定醫(yī)療機(jī)構(gòu)就診并主動(dòng)報(bào)告可疑接觸史。

　　2.對(duì)其接觸的物品、活動(dòng)的區(qū)域等結(jié)合風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估結(jié)果進(jìn)行消毒處理。

　　二、疫情處置相關(guān)工作人員

　　（一）適用范圍。

　　適用于猴痘疫情期間流行病學(xué)調(diào)查、環(huán)境清潔消毒人員的個(gè)人防護(hù)。

　　（二）流行病學(xué)調(diào)查人員防護(hù)要求。

　　1.個(gè)人防護(hù)裝備。一次性乳膠手套、醫(yī)用外科口罩、一次性隔離衣等。

　　2.個(gè)人防護(hù)要求。規(guī)范佩戴口罩，加強(qiáng)手衛(wèi)生，與被調(diào)查人員保持至少1米的距離。

　　3.廢物管理。調(diào)查結(jié)束后，廢棄的個(gè)人防護(hù)裝備暫存、處理和處置應(yīng)按照《醫(yī)療廢物管理?xiàng)l例》執(zhí)行。

　　4.應(yīng)急處置。如在調(diào)查過程中出現(xiàn)口罩脫落、直接接觸了病例皮膚或分泌物等情況，要結(jié)合被調(diào)查人員的臨床診斷結(jié)果、空間的密閉性、接觸的時(shí)間和距離等進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估，結(jié)合風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估結(jié)果，采取相應(yīng)的處置措施。

　　（三）環(huán)境清潔消毒人員防護(hù)要求。

　　1.個(gè)人防護(hù)裝備。一次性乳膠手套、醫(yī)用外科口罩、一次性隔離衣、防水靴套等。

　　2.個(gè)人防護(hù)要求。規(guī)范佩戴口罩，加強(qiáng)手衛(wèi)生，盡量減少與被消毒物品的直接接觸。

　　3.廢物管理。清潔消毒結(jié)束后，廢棄的個(gè)人防護(hù)裝備暫存、處理和處置應(yīng)按照《醫(yī)療廢物管理?xiàng)l例》執(zhí)行。

　　4.應(yīng)急處置。如在清潔消毒過程中出現(xiàn)口罩脫落、皮膚損傷或直接接觸排泄物、血液等情況，要結(jié)合被清潔消毒物品的類型、接觸的時(shí)間和空間的密閉性等進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估，結(jié)合風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估結(jié)果，采取相應(yīng)的處置措施。

　　三、醫(yī)務(wù)人員的個(gè)人防護(hù)

　　（一）適用范圍。

　　適用于猴痘疫情期間醫(yī)務(wù)人員及其工作環(huán)境的防護(hù)。

　　（二）基本要求。

　　1.個(gè)人防護(hù)裝備要求。醫(yī)務(wù)人員執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)預(yù)防，采取經(jīng)接觸傳播和經(jīng)飛沫傳播疾病的隔離與預(yù)防措施，佩戴一次性乳膠手套、KN95/N95及以上級(jí)別的口罩、防護(hù)面屏或護(hù)目鏡、一次性隔離衣等。

　　2.環(huán)境防護(hù)要求。醫(yī)院環(huán)境的清潔消毒應(yīng)符合附件5的要求。應(yīng)避免干除塵、清掃或吸塵等活動(dòng)。首選濕式清潔方法。

　　3.廢物管理。個(gè)人防護(hù)裝備、病例敷料等暫存、處理和處置應(yīng)按照《醫(yī)療廢物管理?xiàng)l例》執(zhí)行。

　　附件7

　　猴痘病毒實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)技術(shù)指南

　　為指導(dǎo)各級(jí)疾控部門和其他相關(guān)機(jī)構(gòu)規(guī)范開展猴痘病毒實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)工作，快速、準(zhǔn)確識(shí)別猴痘確診病例，制定本指南。本指南主要介紹標(biāo)本采集以及猴痘病毒核酸熒光定量PCR檢測(cè)方法、生物安全要求等內(nèi)容。

　　一、檢測(cè)對(duì)象

　　（一）猴痘確診病例和疑似病例；

　　（二）密切接觸者；

　　（三）感染或疑似感染猴痘病毒的動(dòng)物；

　　（四）環(huán)境或其它生物材料。

　　二、技術(shù)人員基本要求

　　（一）采樣人員。從事猴痘病毒核酸檢測(cè)標(biāo)本采集的技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)經(jīng)過生物安全培訓(xùn)，培訓(xùn)合格后方可從事采樣工作。采樣人員應(yīng)熟悉采集標(biāo)本種類和采集方法，熟練掌握標(biāo)本采集操作流程及注意事項(xiàng)，做好標(biāo)本信息記錄，確保標(biāo)本質(zhì)量符合要求、標(biāo)本及相關(guān)信息可追溯。

　　1.采樣人員個(gè)人防護(hù)裝備要求：KN95/N95及以上級(jí)別的口罩、防護(hù)面屏或護(hù)目鏡、一次性隔離衣、一次性乳膠手套（盡可能戴兩層）、靴套；如果接觸了病例血液、體液、分泌物或排泄物，應(yīng)及時(shí)更換手套。污水采樣人員可根據(jù)實(shí)際工作需要，適當(dāng)降低防護(hù)級(jí)別。

　　2.住院病例的標(biāo)本由所在醫(yī)院醫(yī)護(hù)人員采集，根據(jù)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)工作的需要，可結(jié)合病程多次采樣。

　　3.密切接觸者標(biāo)本由當(dāng)?shù)丶部貦C(jī)構(gòu)或醫(yī)療機(jī)構(gòu)專業(yè)人員采集。

　　4.感染或疑似感染猴痘病毒的動(dòng)物由當(dāng)?shù)丶部貦C(jī)構(gòu)協(xié)調(diào)動(dòng)物疫控部門專業(yè)采樣人員負(fù)責(zé)采集。

　　5.環(huán)境或其它生物材料標(biāo)本由相關(guān)專業(yè)采樣人員負(fù)責(zé)采集。

　　（二）檢測(cè)人員。實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)技術(shù)人員應(yīng)具備相關(guān)專業(yè)大專以上學(xué)歷或具有中級(jí)及以上專業(yè)技術(shù)資格，并有2年以上實(shí)驗(yàn)室工作經(jīng)歷，接受過核酸檢測(cè)相關(guān)培訓(xùn)，培訓(xùn)合格后方可從事檢測(cè)工作。實(shí)驗(yàn)室配備的工作人員數(shù)量應(yīng)與所開展檢測(cè)項(xiàng)目及標(biāo)本量相適宜，確保能夠及時(shí)、熟練、準(zhǔn)確地開展實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)和報(bào)告結(jié)果。

　　三、標(biāo)本采集、保存和運(yùn)輸

　　（一）標(biāo)本采集種類。

　　1.首選標(biāo)本是皮膚（黏膜）病變部位標(biāo)本，包括病變表面拭子、痘皰液或痘皰滲出物拭子、痘痂或痘痂拭子等。

　　2.呼吸道標(biāo)本，如口咽拭子，可用于病例急性期檢測(cè)，也是密切接觸者檢測(cè)最常用標(biāo)本。

　　3.發(fā)病急性期可采集EDTA抗凝血標(biāo)本進(jìn)行核酸檢測(cè)。

　　4.采集發(fā)病后7天內(nèi)（急性期）、3-4周后（恢復(fù)期）雙份血清用于抗體檢測(cè)。

　　5.直腸拭子、尿液、精液、唾液等其它標(biāo)本僅用于研究，根據(jù)工作需要采集。

　　6.污水或其它環(huán)境生物材料標(biāo)本根據(jù)實(shí)際工作需要進(jìn)行采集。

　　（二）標(biāo)本采集要求。

　　采集皮膚（黏膜）病變部位標(biāo)本時(shí)應(yīng)使用無菌聚酯纖維、尼龍或類似材質(zhì)拭子，避免使用棉拭子。采集疑似病例的標(biāo)本前應(yīng)避免使用75%乙醇等消毒劑清潔病變部位。每種類型的皮膚（黏膜）病變應(yīng)盡可能采集兩個(gè)以上拭子，每個(gè)病例應(yīng)同時(shí)采集身體不同部位或外觀不同的2-3種病變標(biāo)本。采集皮膚（黏膜）病變部位標(biāo)本時(shí)應(yīng)適當(dāng)用力。皮膚（黏膜）病變部位、痘痂或分泌物等不同拭子標(biāo)本應(yīng)放置于不同的采樣管中。進(jìn)行病毒分離時(shí)應(yīng)采集干拭子標(biāo)本（無采樣液）或以非滅活型病毒采樣液保存。根據(jù)實(shí)驗(yàn)室活動(dòng)資質(zhì)確定使用非滅活型或滅活型采樣液采集標(biāo)本。

　　（三）標(biāo)本采集方法。

　　1.斑疹、丘疹、水皰或膿皰等皮膚（黏膜）病變部位標(biāo)本：一手緊握采樣拭子尾部，手與拭子頭部保持一寸以上距離。采樣時(shí)適當(dāng)用力下壓拭子，在皮損表面來回擦拭至少2-3次，然后以拭子另一面再重復(fù)擦拭2-3次。如果在擦拭過程中痘皰破裂，要確保采集到痘皰液。采樣后將拭子放置于無菌采樣管中（可含病毒采樣液或不含液體），折斷拭子頭，去除拭子尾部，蓋上管蓋，以消毒紙巾擦拭消毒采樣管，以封口膜密封管蓋后將采樣管保存或送檢。

　　2.痘痂或痘皰皮膚（黏膜）標(biāo)本：采樣前應(yīng)確保實(shí)驗(yàn)室可檢測(cè)此類標(biāo)本。使用無菌鑷子或其他鈍頭器械夾取全部痘痂或面積至少4mm×4mm大小的痂皮，放置于干燥、無菌的采樣管中，采樣完成后以創(chuàng)可貼覆蓋患處。

　　3.口咽拭子標(biāo)本：被采集人員頭部微仰，嘴張大，露出兩側(cè)扁桃體，將拭子越過舌根，在被采集者兩側(cè)扁桃體稍微用力來回擦拭至少3次，然后再在咽后壁上下擦拭至少3次，將拭子頭浸入含2-3mL病毒保存液的管中或置于不含液體（干拭子）的無菌管中，尾部棄去，旋緊管蓋。

　　4.血液標(biāo)本：盡量采集急性期（發(fā)病7天內(nèi)）的血液標(biāo)本，建議使用含EDTA抗凝劑的真空采血管采集5mL全血，可利用全血進(jìn)行檢測(cè)，或室溫靜置30分鐘后，1500-2000rpm離心10分鐘，收集血漿于無菌管中進(jìn)行檢測(cè)。

　　5.血清標(biāo)本：用真空負(fù)壓采血管采集血液標(biāo)本5mL，室溫靜置30分鐘，1500-2000rpm離心10分鐘，收集血清于無菌螺口塑料管中。第一份血清應(yīng)盡早（最好在發(fā)病后7天內(nèi)）釆集，第二份血清應(yīng)在發(fā)病后第3-4周采集，采集血液標(biāo)本5mL后室溫靜置30分鐘，1500-2000rpm離心10分鐘，收集血清于無菌螺口塑料管中，用于猴痘抗體檢測(cè)。

　　6.其他標(biāo)本：依據(jù)設(shè)計(jì)需求規(guī)范采集。

　　（四）標(biāo)本保存。

　　標(biāo)本應(yīng)在收集后1小時(shí)內(nèi)冷藏（2-8℃）或冷凍（-20℃或以下），并盡快進(jìn)行檢測(cè)?？稍?周內(nèi)檢測(cè)的標(biāo)本可置于4℃環(huán)境中保存；1周內(nèi)無法檢測(cè)的標(biāo)本，短期可置于-20℃環(huán)境中保存，長(zhǎng)期應(yīng)置于-70℃或以下環(huán)境中保存。全血分離血漿前冷藏（2-8℃），分離出的血漿置于-20℃或以下環(huán)境中保存。應(yīng)設(shè)立專庫(kù)或?qū)９駟为?dú)保存標(biāo)本，避免反復(fù)凍融標(biāo)本。

　　猴痘病毒及其相關(guān)標(biāo)本應(yīng)由專人管理，準(zhǔn)確記錄病毒及標(biāo)本的來源、編號(hào)、數(shù)量等信息，具體要求可參考《病原微生物菌（毒）種保藏?cái)?shù)據(jù)描述通則》（T/CPMA 011-2020）。應(yīng)采取有效措施確保病毒及標(biāo)本安全，嚴(yán)防發(fā)生誤用、惡意使用、被盜、被搶、丟失、泄露等事件。

　　（五）標(biāo)本送檢。

　　標(biāo)本采集后應(yīng)盡快在低溫條件下（冰袋或干冰）送往實(shí)驗(yàn)室，如需長(zhǎng)途運(yùn)輸標(biāo)本，應(yīng)采用干冰冷凍運(yùn)輸方式進(jìn)行保藏。

　　1.送檢標(biāo)本：病例標(biāo)本先由省級(jí)及以下疾控機(jī)構(gòu)進(jìn)行初步檢測(cè)，各省首例猴痘陽性標(biāo)本應(yīng)送中國(guó)疾控中心病毒病所復(fù)核。每個(gè)陽性病例至少采集一套標(biāo)本（皮膚或黏膜病變部位標(biāo)本、口咽拭子標(biāo)本及急性期、恢復(fù)期雙份血清標(biāo)本）送中國(guó)疾控中心病毒病所檢測(cè)。各省級(jí)疾控機(jī)構(gòu)根據(jù)實(shí)際情況制定省內(nèi)樣本送檢、復(fù)核流程。

　　2.病原體及標(biāo)本運(yùn)輸：

　　（1）國(guó)內(nèi)運(yùn)輸。猴痘病毒或其他潛在感染性生物材料的運(yùn)輸包裝分類屬于A類，對(duì)應(yīng)的聯(lián)合國(guó)編號(hào)為UN2814，包裝符合國(guó)際民航組織文件Doc9284《危險(xiǎn)品航空安全運(yùn)輸技術(shù)細(xì)則》的PI602分類包裝要求，通過其他交通工具運(yùn)輸?shù)目蓞⒄找陨蠘?biāo)準(zhǔn)包裝。猴痘病毒或其他潛在感染性材料運(yùn)輸應(yīng)按照《可感染人類的高致病性病原微生物菌（毒）種或樣本運(yùn)輸管理規(guī)定》（原衛(wèi)生部令第45號(hào)）辦理《準(zhǔn)運(yùn)證書》。污水等環(huán)境標(biāo)本暫按普通生物樣本運(yùn)輸標(biāo)準(zhǔn)執(zhí)行。

　　（2）國(guó)際運(yùn)輸。猴痘毒株或樣本在國(guó)際間運(yùn)輸?shù)模瑧?yīng)規(guī)范包裝，按照《出入境特殊物品衛(wèi)生檢疫管理規(guī)定》辦理相關(guān)手續(xù)，并滿足相關(guān)國(guó)家和國(guó)際相關(guān)要求。

　　四、猴痘病毒核酸檢測(cè)要求及流程

　　（一）實(shí)驗(yàn)室資質(zhì)要求。

　　開展猴痘病毒核酸檢測(cè)的實(shí)驗(yàn)室，應(yīng)當(dāng)符合《病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理?xiàng)l例》（國(guó)務(wù)院令第424號(hào)）或《醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室管理辦法》（衛(wèi)辦醫(yī)政發(fā)〔2010〕194號(hào)）有關(guān)規(guī)定，具備設(shè)區(qū)的市級(jí)衛(wèi)生健康部門備案的生物安全二級(jí)（BSL-2）實(shí)驗(yàn)室及以上實(shí)驗(yàn)室條件，并備案猴痘病毒相關(guān)實(shí)驗(yàn)活動(dòng)。獨(dú)立設(shè)置的醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室還應(yīng)符合《醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室基本標(biāo)準(zhǔn)（試行）》《醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室管理規(guī)范（試行）》等要求。

　　開展猴痘病毒分離、培養(yǎng)、中和等涉及病毒擴(kuò)增、使用等實(shí)驗(yàn)操作的實(shí)驗(yàn)室應(yīng)具備國(guó)家衛(wèi)生健康委批準(zhǔn)的生物安全三級(jí)（BSL-3）實(shí)驗(yàn)室及以上實(shí)驗(yàn)室條件，且獲得猴痘病毒實(shí)驗(yàn)活動(dòng)批準(zhǔn)。分離的猴痘病毒應(yīng)送國(guó)家病原微生物保藏中心/國(guó)家病原微生物資源庫(kù)病毒分庫(kù)保藏。

　　（二）實(shí)驗(yàn)室生物安全要求。

　　根據(jù)2006年公布實(shí)施的《人間傳染的病原微生物名錄》（簡(jiǎn)稱《名錄》），猴痘病毒生物危害分類為第一類，是一種高致病性病毒。按照《名錄》要求，猴痘病毒的分離、培養(yǎng)等涉及病毒擴(kuò)增及使用的實(shí)驗(yàn)操作需在BSL-3及以上實(shí)驗(yàn)室的生物安全柜內(nèi)進(jìn)行；非滅活采樣液采集的猴痘病例樣本的滅活在BSL-3實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行；樣本滅活后猴痘病毒DNA提取、檢測(cè)可在BSL-2及以上實(shí)驗(yàn)室或PCR檢測(cè)的專門區(qū)域或房間進(jìn)行。如《名錄》更新，開展猴痘病毒操作的實(shí)驗(yàn)室生物安全要求應(yīng)按最新《名錄》執(zhí)行。污水樣本的滅活參照普通生物樣本。

　　（三）實(shí)驗(yàn)室分區(qū)要求。

　　原則上開展猴痘病毒核酸檢測(cè)的實(shí)驗(yàn)室應(yīng)當(dāng)設(shè)置以下區(qū)域：試劑儲(chǔ)存和準(zhǔn)備區(qū)、標(biāo)本制備區(qū)、擴(kuò)增和產(chǎn)物分析區(qū)。三個(gè)區(qū)域在物理空間上應(yīng)完全相互獨(dú)立，空氣應(yīng)定向流通。各區(qū)功能分別是：

　　1.試劑儲(chǔ)存和準(zhǔn)備區(qū)：貯存試劑的制備、試劑的分裝和擴(kuò)增反應(yīng)混合液的制備，以及離心管、吸頭等消耗品的貯存和準(zhǔn)備。

　　2.標(biāo)本制備區(qū)：轉(zhuǎn)運(yùn)桶開啟、標(biāo)本滅活，核酸提取及加入至擴(kuò)增反應(yīng)管等。

　　3.擴(kuò)增和產(chǎn)物分析區(qū)：核酸擴(kuò)增和產(chǎn)物分析。

　　根據(jù)使用儀器的功能，區(qū)域可適當(dāng)合并。如采用標(biāo)本處理、核酸提取及擴(kuò)增檢測(cè)為一體的自動(dòng)化分析儀，標(biāo)本制備區(qū)、擴(kuò)增和產(chǎn)物分析區(qū)可合并。

　　（四）主要儀器設(shè)備。

　　實(shí)驗(yàn)室應(yīng)當(dāng)配備與開展檢驗(yàn)項(xiàng)目相適宜的儀器設(shè)備，包括：二級(jí)生物安全柜、高速臺(tái)式離心機(jī)、干浴恒溫器、熒光定量PCR儀、計(jì)時(shí)器、移液器。

　　（五）實(shí)驗(yàn)室猴痘病毒核酸檢測(cè)流程。

　　實(shí)驗(yàn)室接到標(biāo)本后，按照標(biāo)準(zhǔn)操作程序進(jìn)行試劑準(zhǔn)備、標(biāo)本前處理、核酸提取、核酸擴(kuò)增、結(jié)果分析及報(bào)告。實(shí)驗(yàn)室應(yīng)當(dāng)建立可疑標(biāo)本和陽性標(biāo)本復(fù)檢流程。

　　1.試劑與材料。

　　（1）標(biāo)本：包括病變表面拭子、痘皰液或痘皰滲出液拭子、痘痂或痘痂拭子、咽拭子、全血或血漿等標(biāo)本。

　　（2）核酸提取試劑盒（基因組DNA提取試劑盒）：組織基因組DNA提取試劑盒或血液/細(xì)胞/組織基因組DNA提取試劑盒。

　　（3）核酸檢測(cè)試劑：

　　①試劑：DNA聚合酶或預(yù)混的PCR反應(yīng)試劑（PCR Master Mix）。

　　②猴痘病毒檢測(cè)引物、探針:

　　③陽性對(duì)照：涵蓋檢測(cè)靶標(biāo)序列的質(zhì)粒。

　　（4）滅菌去離子水、無水乙醇

　　（5）消毒液

　　①75%乙醇：用于手部和物體表面常規(guī)消毒，開啟后有效期為1周。

　　②含氯消毒液：現(xiàn)用現(xiàn)配，含有效氯1000mg/L的消毒液用于物體表面常規(guī)消毒，含有效氯5000mg/L的消毒液用于感染性材料溢灑時(shí)的應(yīng)急處理。

　　（6）耗材：包括帶濾芯的吸頭、螺旋口的離心管、非螺旋口的離心管、含鋯珠的粉碎管、PCR反應(yīng)板和透明封膜或PCR反應(yīng)管和透明蓋。

　　（7）BSL-2個(gè)人防護(hù)用品：包括KN95/N95口罩及以上級(jí)別的口罩、一次性隔離衣、防護(hù)眼罩或面屏、一次性帽子、鞋套、靴套和手套。

　　2.實(shí)驗(yàn)前的標(biāo)本接收。

　　（1）核對(duì)被檢標(biāo)本編號(hào)、姓名、性別、年齡及檢測(cè)項(xiàng)目；

　　（2）待檢標(biāo)本的狀態(tài)如有異常，需注明；

　　（3）待檢標(biāo)本長(zhǎng)期存放在-70℃，短期存放可在-20℃，避免反復(fù)凍融。

　　3.核酸檢測(cè)操作步驟及注意事項(xiàng)。

　　（1）病毒核酸（DNA）的制備

　　操作方法按DNA提取試劑盒相應(yīng)說明書進(jìn)行操作，具體如下：

　　①提取試劑準(zhǔn)備：第一次開啟試劑盒，在使用前先在漂洗液中加入無水乙醇，加入體積參照瓶上標(biāo)簽。所有試劑在使用前應(yīng)平衡至室溫；所有離心步驟應(yīng)在室溫下進(jìn)行。

　　②處理樣本：

　　A.痘皰液：干拭子標(biāo)本需以適當(dāng)體積的含PS的PBS或DMEM重懸后檢測(cè)。取100μL樣本，加入80μL緩沖液，總量為180μL；標(biāo)本體積不足100μL時(shí)用緩沖液補(bǔ)足總體積至180μL；

　　B.病變皮疹或痘痂：取1塊痂皮按質(zhì)量/體積（1mg/50μL）加入相應(yīng)體積含PS的PBS，研磨或勻漿處理，取80μL，然后加入100μL緩沖液；

　　C.咽拭子、其它拭子：從采樣液中取200μL標(biāo)本，干拭子標(biāo)本可用3mL含PS的PBS或DMEM重懸，混勻后取200μL；

　　D.全血或血清：直接取200μL標(biāo)本。

　　③加入20μL蛋白酶K溶液，混勻，溶液會(huì)變清亮。若樣本為病變皮疹或其它組織時(shí)，加入蛋白酶K混勻后，在56℃放置，直至組織溶解，再進(jìn)行下一步驟。

　　④加入200μL裂解緩沖液，充分混勻，70℃放置10分鐘，或至溶液變清亮，簡(jiǎn)短離心以去除管蓋內(nèi)壁水珠。

　　需注意：加入裂解緩沖液后可能會(huì)出現(xiàn)白色絮狀沉淀，在70℃放置后會(huì)消失。如溶液未變清亮，說明細(xì)胞裂解不徹底，可能導(dǎo)致提取DNA量少或提取出的DNA不純。

　　⑤加200μL無水乙醇，充分混勻，此時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀沉淀，簡(jiǎn)短離心以去除管蓋內(nèi)壁水珠。

　　⑥將上一步驟所得溶液和絮狀沉淀均加至吸附柱中（吸附柱放入廢液收集管中），8000rpm離心1分鐘，棄廢液。

　　⑦加入500μL漂洗緩沖液1（使用前先檢查是否已加入無水乙醇），8000rpm離心1分鐘，棄廢液。

　　⑧加入500μL 漂洗緩沖液2（使用前先檢查是否已加入無水乙醇），最大轉(zhuǎn)速13000rpm離心3min，棄廢液。

　　⑨將吸附柱放回廢液收集管中，最大轉(zhuǎn)速13000rpm離心1分鐘，盡量去除漂洗液。

　　⑩將吸附柱轉(zhuǎn)入一根干凈的離心管中(需自行準(zhǔn)備，試劑盒中未提供)，加入50μL洗脫緩沖液或滅菌去離子水，室溫放置2-5分鐘，8000rpm離心1分鐘。收集濾出液，做好標(biāo)記，4℃或-20℃（短期）保存?zhèn)溆茫?70℃長(zhǎng)期保存。

　　（2）核酸檢測(cè)：實(shí)時(shí)熒光定量PCR（qPCR）方法檢測(cè)猴痘病毒核酸（PCR實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行）。

　　①反應(yīng)體系的準(zhǔn)備：每孔20μL，加入5μL樣本DNA，共計(jì)25μL；每次PCR反應(yīng)，除檢測(cè)標(biāo)本外，應(yīng)加無DNA對(duì)照（用水代替DNA）、陽性對(duì)照；所有樣本，包括對(duì)照，應(yīng)設(shè)復(fù)孔。

　　②加樣: 每根反應(yīng)管中加入核酸或?qū)φ崭?uL，蓋緊管蓋或封好透明膜，置于熒光定量PCR檢測(cè)儀上。

　　③擴(kuò)增條件設(shè)定：

　　④儀器檢測(cè)通道選擇:使用熒光定量PCR檢測(cè)儀，選擇Fam熒光信號(hào)檢測(cè)通道，收集設(shè)在60℃。具體設(shè)置方法參照各儀器使用說明書。

　　⑤結(jié)果分析閾值設(shè)定:使用熒光定量PCR檢測(cè)儀進(jìn)行結(jié)果分析時(shí)，基線取3-10或6-15個(gè)循環(huán)的熒光信號(hào)，閾值設(shè)定原則為閾值線剛好超過正常陰性對(duì)照擴(kuò)增曲線最高點(diǎn)，也可根據(jù)儀器噪音情況調(diào)整閾值。

　　（3）核酸檢測(cè)結(jié)果判斷

　　①Real-time PCR反應(yīng)系統(tǒng)的質(zhì)量控制:反應(yīng)結(jié)果應(yīng)同時(shí)符合以下2個(gè)條件，否則試驗(yàn)結(jié)果無效，應(yīng)重新開展檢測(cè)。陰性對(duì)照無擴(kuò)增，為陰性。陽性對(duì)照未出現(xiàn)陰性結(jié)果。

　　②結(jié)果判定：

　　A.陰性：雙孔Ct值＞37，或無Ct值；

　　B.灰區(qū)：一孔Ct值＞37；

　　C.陽性：雙孔Ct值＜37。

　　所有陽性和處于灰區(qū)的標(biāo)本應(yīng)重復(fù)檢測(cè)或經(jīng)序列分析進(jìn)行確診。需注意：當(dāng)標(biāo)本僅為咽拭子或血清、血漿，且檢測(cè)結(jié)果為陰性時(shí)，應(yīng)結(jié)合臨床癥狀，慎重做出陰性診斷。

　　（4）表格記錄

　　做好熒光定量實(shí)時(shí)PCR方法檢測(cè)猴痘病毒核酸原始記錄。

　　五、猴痘病毒全基因組測(cè)序

　　1.測(cè)序標(biāo)本選取原則。本土疫情中的首發(fā)或早期病例、與早期病例有流行病學(xué)關(guān)聯(lián)的關(guān)鍵病例、感染來源不明的本土病例、境外輸入病例陽性標(biāo)本等。以上標(biāo)本在核酸熒光定量PCR檢測(cè)Ct值≤32時(shí)進(jìn)行測(cè)序（關(guān)鍵樣本除外）。

　　2.測(cè)序要求。以省為單位確定開展猴痘病毒全基因組測(cè)序的機(jī)構(gòu)。建議使用擴(kuò)增子技術(shù)進(jìn)行猴痘病毒全基因組測(cè)序。測(cè)序數(shù)據(jù)經(jīng)質(zhì)控合格后方可用于后續(xù)生物信息分析。二代測(cè)序平臺(tái)覆蓋深度應(yīng)不低于10×，三代測(cè)序平臺(tái)覆蓋深度應(yīng)不低于50×，全基因組測(cè)序覆蓋度應(yīng)不低于98%。數(shù)據(jù)比對(duì)分析推薦參考猴痘基因組NC_063383.1。

　　各省應(yīng)建立本省輸入、本土病例猴痘病毒基因組數(shù)據(jù)庫(kù)，應(yīng)具備序列對(duì)比分析能力。具備測(cè)序條件的省份要在接收標(biāo)本后48小時(shí)內(nèi)開展測(cè)序工作，關(guān)鍵樣本要求實(shí)驗(yàn)室收到標(biāo)本后1周內(nèi)提供測(cè)序結(jié)果報(bào)告，所有測(cè)序原始數(shù)據(jù)(一般為fastq格式)、組裝序列（一般為fasta格式）和標(biāo)本序列測(cè)定結(jié)果報(bào)告單（見附件7-2）應(yīng)在獲得序列48小時(shí)內(nèi)報(bào)送中國(guó)疾控中心病毒病所進(jìn)行序列匯總、分析。病毒病所應(yīng)將序列分析結(jié)果及時(shí)反饋各省，并將全國(guó)猴痘病毒序列匯總、分析結(jié)果及時(shí)上報(bào)國(guó)家疾控局。

　　3.分子分型。推薦使用在線分析工具Nextclade（https:// clades.nextstrain.org）對(duì)變異株進(jìn)行分子分型。

　　附件：

　　7-1猴痘病毒檢測(cè)標(biāo)本送檢表

　　7-2猴痘病毒標(biāo)本序列測(cè)定結(jié)果報(bào)告單